Правила забора материала для микробиологического исследования (ликбез)

            Биологический материал целесообразно получать до начала антимикробной терапии.

• Материал для бактериологического исследования берут непосредственно из очага инфекции или исследуют клинически значимый биологический материал.
• Необходимо соблюдать асептику, избегая контаминации биологического материала посторонней микрофлорой.
• Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования.
• Собирают материал в стерильную посуду с пробками, полученную в микробиологической лаборатории: для взятия отделяемого из раны, мазков со слизистых оболочек, из глаза, уха, носа, зева, цервикального канала, влагалища, анального отверстия следует использовать стерильные ватные  тампоны, для крови, гноя, спинномозговой жидкости и экссудатов используют стерильные шприцы и специализированные транспортные среды, для мокроты, мочи и кала - стерильные плотно закрывающиеся небьющиеся контейнеры.

Внимание: необходимо следить за сроками годности посуды, полученной в лаборатории. Если посуда, стерилизуемая в лаборатории, не использована в срок, указанный на этикетках её необходимо вернуть в лабораторию для повторной стерилизации.

• Нативный материал доставляют в лабораторию в максимально короткие сроки (для  большинства образцов не позднее 1,5-2 ч после их получения). Допускается хранение материала в холодильнике при 4° С (это не относится к биологическому материалу, полученному из стерильных в норме локусов: ликвору, крови, внутрисуставной и плевральной жидкости!).
• При использовании транспортных сред биологический материал можно хранить в течение 24 ч.
• Жидкий   биологический   материал   можно транспортировать непосредственно в шприце, на кончик которого надет стерильный колпачок или загнутая под углом игла.
• Для исследования на анаэробы биологический материал необходимо помещать в анаэробные условия. Для жидких образцов (кровь, гной, экссудат, жидкости из стерильных полостей) используют специальные флаконы с жидкой питательной средой, заполненные газовой смесью определенного состава, куда из шприца уколом иглы через резиновую плотно завальцованную крышку вносят материал. Можно использовать анаэробные коммерческие тампоны с транспортной средой.
• Транспортировка осуществляется  в металлических  биксах  (пеналах), термоконтейнерах,  которые должны легко подвергаться обработке.
• К материалу прилагают сопроводительный до­кумент, где указывают наименование, источник и метод получения биологического материала, дату и время его взятия; ФИО, пол и возраст больного; название учреждения, отделения, № палаты; пред­полагаемый диагноз инфекционной патологии и предшествующую антибактериальную терапию; фамилию и подпись врача, направившего материал для проведения бактериологического исследова­ния.
  

Внимание: погрешности в правилах сбора материала для микробиологического исследования приводят к ошибкам в диагностике возбудителя и определении его антибиотикочувствительности.

• Для взятия крови используют стерильные  шприцы или системы для одноразового пользования.
• Кровь берут  во время подъёма температуры из периферической  вены  с соблюдением правил асептики  и мер индивидуальной защиты, предусмотренных при работе с кровью (использовать резиновые перчатки).
• Кровь засевают в питательные среды сразу после взятия у постели больного или процедурной.
• Перед использованием флаконов визуально определяют прозрачность среды, любое помутнение свидетельствует об их непригодности.
• При подозрении на анаэробную инфекцию необходимо одномоментно собирать кровь в два флакона – с питательными средами для аэробного и анаэробного культивирования.
• Не следует брать кровь из сосудистых катетеров, кроме случаев, когда предполагается инфекция  катетерного происхождения.

             Забор   и посев крови

Для предотвращения контаминации кожу пациента  над пунктируемой веной тщательно обработать  следующей последовательности:

• 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком)
• 5% настойкой йода (или йодопирона, йодоната, хлоргексидина) начиная обработку от центра будущего прокола к периферии  - 30 секунд
• этиловым 70% спиртом  (или заменяющим его антисептиком)
• дают высохнуть обработанному участку кожи
• не пальпируя вену повторно, производят венепункцию
• вновь обрабатывают участок 70% этиловым спиртом  (или заменяющим его антисептиком).
• При аллергической реакции на йод кожу дважды обрабатывают 70% этиловым спиртом  (или заменяющим его антисептиком).

 Использование сред, приготовленных в лаборатории:

• Посев осуществляют во флаконы со средами  над пламенем спиртовой горелки.
• Взятие и посев крови осуществляют два человека – в то время как один обрабатывает кожу пациента, пунктирует вену и берёт кровь, другой - над пламенем спиртовки
  
• открывает пробки флаконов, подставляет флаконы со средой под струю крови из шприца или системы, обжигает горлышки и пробки флаконов и закрывает их.
• Рекомендуемое соотношение объёмов крови и среды 1:10 (10 мл у  взрослых, 5 мл у детей)
  

o   для аэробных микроорганизмов (с  зелёной крышкой)

o   для анаэробных микроорганизмов (с красной крышкой)

o   педиатрические флаконы – (с жёлтой крышкой) для исследования крови в объёме до 5 мл

• Снимают предохранительную пластиковую крышку.
• Дезинфицируют резиновую пробку флакона 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком).
• Дают просохнуть обработанной поверхности.
• Прокалывают пробку флакона иглой шприца и производят посев крови.
• Объём исследуемой крови по  прилагаемой инструкции  - обычно 10-30 мл для взрослых и 1- 5 мл для детей до 12 л (метка на этикетке флакона позволяет оценить объём взятой крови).
• Сначала производят посев в «анаэробный» флакон, затем – в «аэробный» во избежание попадания воздуха из шприца.
• Перемешивают  осторожно круговыми движениями содержимое флакона.
• Маркируют флаконы и до транспортировки в лабораторию содержат в термостате или при комнатной температуре в защищённом от света месте  (не в холодильнике!!)
• Исследования крови и других жидкостей организма с помощью анализатора  культур крови BacT/ALERT-
  

 При отсутствии в отделении флаконов для гемокультур. 

• В исключительных случаях, при экстренной ситуации допускается использование 20-миллилитрового шприца с иглами.
• В шприц предварительно набирают 0,5-0,7 мл стерильного гепарина.
• Заменяют иглу.
• Затем пунктируют вену, соблюдая правила асептики. Набирают 10-15- мл крови.
• Перемешивают осторожным покачиванием с гепарином (иглу со шприца не снимают).
• В этом же шприце с согнутой у основания иглой (или надетым стерильным колпачком) немедленно отправляют в лабораторию.
  

             Исследование сосудистого катетера.

• Исследуют при подозрении на инфекцию  катетерного происхождения.
• В асептических условиях отрезают его дистальный (внутрисосудистый) конец около 5 см длиной. 
•  Помещают в стерильный контейнер (пробирку).
•  Доставляют в лабораторию немедленно.
• Важно не допускать высыхания образца.

• Спинномозговую  жидкость    получают   при  люмбальной  пункции или пунции боковых желудочков мозга  в объеме  3 -5 мл, помещают  в  стерильную, желательно  центрифужную  пробирку и  немедленно доставляют  в лабораторию. 
  
• Полученную пробу доставить в лабораторию, избегая чрезмерного перегрева и особенно охлаждения (может  быть  использован  термос). Охлаждение ликвора ниже 30⁰ ведёт к гибели менингококков.
• При невозможности немедленно доставить в лабораторию ликвор сохраняют при   37⁰ в термостате.
• При использовании коммерческих сред (BacT/ALERTFA и др.)  свежевзятый ликвор в количестве 5-10 мл  из шприца, проколов резиновую пробку, вносится во флакон со средой (см. исследование крови).
  

• Исследуют перитонеальную, синовиальную, плевральную, суставную, перикардиальную жидкости.
• Для бактериологического исследования используют жидкости, взятые при пункции и аспирации.
• Попавшие в шприц  пузырьки воздуха удаляют и помещают жидкость в анаэробную транспортную систему или отправляют её в шприце, предварительно сняв (или загнув) иглу или надевают на канюлю защитный стерильный колпачок. 
• Минимальный объём жидкости для выделения бактерий 1-5 мл, для выделения грибов или микобактерий не менее 10 мл.
•  Избыток жидкости или гной транспортировать в стерильных контейнерах с завинчивающейся крышкой.
• Взятие материала тампоном не предохраняет анаэробы от воздействия кислорода воздуха, не позволяет приготовить качественный препарат для микроскопии, не гарантирует выделение культуры при незначительном количестве микробов в образце.
• Не рекомендуется использовать антикоагулянты (цитрат, этилендиаминтетрауксусную кислоту), подавляющие рост некоторых видов бактерий.
• При необходимости лучше использовать гепарин.
• При достаточном количестве жидкости можно производить посев  из шприца во флаконы  со средой  для  гемокультур в соотношении 1:5 - 1:10 (5-10 мл). Однако при этом становится невозможной прямая бактериоскопия материала, а сроки идентификации  удлиняются на сутки в сравнении с изолятами, выделенными при первичном посеве на плотные среды.
  

             Исследование материала при раневой инфекции

• Взятие материала производит  лечащий врач во время операции или перевязки.
• В большинстве случаев исследуют поражённые ткани и аспираты.
• Наиболее правильный способ взятия жидких материалов – объёмно с помощью стерильного шприца. Отбор материала тампоном производят только при невозможности  
• осуществления объёмного метода.
• Промыванием  раневой поверхности физ. раствором удаляют местно применяемые антисептические и антибактериальные препараты
• Кожу вокруг раны  обрабатывают   спиртом   или другим  антисептиком, некротические массы, детрит, гной удаляют стерильной сухой салфеткой.
• Все ёмкости с отобранным материалом плотно закрывают стерильными пробками.
• Доставляют в лабораторию в течение 1 часа. При невозможности доставить материал в течение этого времени, он должен храниться в холодильнике, но не более 2 часов.
  

Можно использовать специальные транспортные контейнеры и пробирки со  средами. На транспортной среде материал хранится   24 часа.

Отделяемое открытых инфицированных ран.

Материал берут двумя стерильными  тампонами (один для посева, второй - для бактериоскопии) круговыми  вращательными   движениями   от  центра к периферии  поражённого участка  помещают в стерильную пробирку.

• Берут стерильным  шприцем  и в количестве 1-2 мл  помещают  в  стерильную  пробирку или доставляют в шприце.
• Можно использовать для исследования  концы удалённых дренажных трубок

Помещают  в  другую плотно закрывающуюся  стерильную ёмкость (пробирку), содержащую небольшое количество стерильного физ. раствора.

Глубокие раны или абсцессы.

• Поверхность раны дезинфицируют 70% этиловым спиртом, затем 1-2% йодным раствором.
•  Материал берут из глубины, избегая контаминации поверхностной микрофлорой раны.

Биоптат с ожоговой поверхности

 Поверхность раны дезинфицируют и берут образец с помощью пункционной биопсии (3-4 мм) для количественного исследования.

• Пораженную область кожи дезинфицируют, удаляют поверхностный слой и делают соскоб со дна язвы или узелкового утолщения.
• Если имеется экссудат, его собирают шпри­цем или стерильным тампоном.

Раны после укусов

• Гнойное содержимое из раны получают шприцем после надреза, дренирования или поверх­ностной обработки инфицированной раны.
• При свежих укусах бактериологическое ис­следование не проводят, так как в этот период труд­но выделить этиологически значимый микроорга­низм.

• Материал получают при оперативном вмеша­тельстве. Образец помещают в стерильный контей­нер без формалина и других консервантов.
• Для предотвращения высыхания образца в контейнер может быть добавлен стерильный физ.­раствор.
  

             Образцы из зева

• Исследуют прежде всего для выявления α-гемолитических стрептококов группы А,  H.influenzae( при эпиглотитах).При наличии специфического анамнеза проводят исследование для исключения гонококковой этиологии фарингита.
• Не следует брать материал при воспалённом надгортаннике, так как может возникнуть обструкция дыхательных путей!
• Мазок из зева  следует брать до еды или через 2 - 3 часа  после приёма пищи. Перед взятием пробы больному необходимо прополоскать  рот  тёплой кипячёной водой.
• Аккуратно прижимая язык шпателем, вводят стерильный тампон между дужками миндалин и язычком.
•  Движением тампона вперёд и назад собирают материал с задней поверхности глотки, миндалин и участков воспаления или изъязвления слизистой.
  
• Тампон помещают в стерильную пробирку, при необходимости используя транспортную среду.

Внимание: При взятии пробы со слизистой зева (глотки) нельзя касаться щёк, языка, дёсен, а также собирать слюну.

                Взятие  материала  при  исследовании   на возбудителей  дифтерии.

• Для    взятия     материала   используют    стерильные   ватные    сухие   тампоны. 
• Материал  из  ротоглотки  и носа берут отдельными  тампонами, натощак  или  не  ранее, чем через  2 часа  после  еды,  при  хорошем  освещении с использованием   шпателя, не касаясь тампоном  языка, слизистых  щек и зубов. 
• При наличии  налетов  материал  следует  брать  с границы  пораженных и здоровых    тканей, слегка  нажимая  на  них  тампоном.
• Для взятия  материала  из  носа используют  один тампон, который вводят  сначала в один, а потом  в другой  носовой  ход,  не  касаясь  крыльев   носа  снаружи
• Необходимо обеспечить доставку материала в лабораторию не позднее 2-х часов, а при использовании глицериновых тампонов - в течение 4-х часов.

               Бактериологическое  исследование  носоглоточной  слизи  на менингококки

• Исследуемый  материал  берут  из  задней  стенки  носоглотки  натощак  или через  3 - 4 часа  после   еды  стерильным  ватным  тампоном, укрепленным  на  изогнутой   проволоке.
• Материал  берут  с обязательным  надавливанием  шпателем  на  корень  языка.    Тампон  вводят   концом  кверху  за мягкое  небо  в  носоглотку  и   проводят  2 -3   раза   по  задней   стенке.
•  При  извлечении  тампон не должен  касаться  зубов, слизистой  щек,  языка и язычка.
• Материал  может быть  взят   смоченным   тампоном,  который  затем   доставляют  в  лабораторию.
• Питательную   среду   для  смачивания  тампонов  получают  в   бактериологической   лаборатории.  Можно использовать  специальные транспортные среды.
• Полученную пробу доставить в лабораторию, избегая охлаждения
  

              Мазок со слизистой передних отделов полости носа.

• Исследование обычно проводится для выявления носительства метициллинрезистентных штаммов S.aureus.
• Мазок со слизистой носа берут одним стерильным тампоном.
• Тампон вводится  сначала в здоровую ноздрю до упора на уровне носовой раковины и вращательными движениями собирают материал  со слизистой. Повторяют процедуру в другом носовом ходе.
• Тампон помещают в стерильную пробирку.

              Аспират из придаточных пазух

• Исследуют при бактериальных синуситах помимо исследования микрофлоры носовой полости.
• Материал отсылают в лабораторию в анаэроб­ной транспортной среде или непосредственно в шприце.  
• He рекомендуется исследовать промывную жидкость из носоглотки, так как образцы контаминируются нормальной микрофлорой верх­них дыхательных путей, что не позволяет правиль­но трактовать результаты анализа.
• При хронических синуситах возможен прицельный забор материала для микробиологического исследования с использованием эндоскопов.

            Жидкость при тимпаноцентезе

• Исследуют при среднем отите в случаях, если первичная терапия оказалась безуспешной или если тимпаноцентез проводился как лечебная процедура.
• Очищают наружный слуховой проход слабым раствором детергента, после прокола барабанной перепонки врач-отоларинголог шприцем собирает жидкость и помещает ее в стерильный контейнер или отправляет в лабораторию в шприце с загнутой иглой или с защитным колпачком.
• При невозмож­ности своевременной доставки целесообразно ис­пользовать транспортную среду.
• При самопроизвольной перфорации барабан­ной перепонки экссудат собирают стерильным там­поном, используя слуховое зеркало. Однако в этом случае высока вероятность контаминации биологи­ческого материала эндогенной микрофлорой.

            Материал при воспалении наружного уха.

• Обрабатывают кожу 70% этиловым спиртом и промывают стерильным изотоническим раствором хлорида натрия (физраствором).
• Материал из очага берут стерильным ватным тампоном. Тампон помещают в стерильную пробирку.
• При поражении среднего и внутреннего уха исследуют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранные в стерильную пробирку или транспортную среду.

• Накануне, за 6-8 часов (на протяжении ночи, предшествующей забору материала) отменяют все медикаменты и процедуры.
• Материал забирают  с  пораженных  мест в разгар воспалительного процесса с соблюдением правил асептики.

             Отделяемое с конъюнктивы

• Берут стеклянными стерильными палочками или платиновой петлей, предварительно фламбированной в пламени спиртовки и остуженной и погружают в 0,2 % сахарный бульон. 
• При наличии достаточно обильного гнойного отделяемого использую стерильные ватные тампоны (желательно коммерческие), которыми берут гной с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели.
• Необходимо следить, чтобы при моргании ресницы не касались тампона (придерживать веки руками)

             Край век.     

Корочки гноя удаляют пинцетом. Берут материал из язвочки у основания ресниц.

             Роговица.

• Материал на исследование после обезболивания, можно взять платиновой петлёй или другим подходящим инструментом.
• Если пациент применяет контактные линзы, необходимо исследовать их внутреннюю поверхность.
• В кабинете врача производят посев на питательный бульон.
• Пробы клинического материала доставить в лабораторию не замочив пробки, чтобы не исказить результат исследования.

 
             Мокрота.

• Исследуют свободно откашливаемую мокроту, утреннюю порцию, натощак
• Пациент предварительно должен почистить зубы, дёсны, язык, слизистую оболочку щёк зубной щёткой  и прополоскать рот кипяченой   водой.
• Если мокрота отделяется плохо, накануне пациенту дают отхаркивающие средства или проводят ингаляцию физ. раствором.
• Мокроту собирают в стерильную  посуду  с крышкой.
• Сроки доставки мокроты в лабораторию не должны превышать 1,5-2 часа от момента  её получения  (допускается хранение в холодильнике, но не более 6 часов), т.к. задержка ведёт к аутолизу S.pneumoniae, а за счёт размножения бактерий-контаминантов меняется истинное соотношение микрофлоры бронхиального секрета. 

            Качество собранной мокроты можно оценить по данным микроскопии  нативных мазков по Граму.

 При наличии в мазке мокроты более 10 эпителиальных клеток в поле зрения и менее 25 полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПЯЛ) при малом увеличении микроскопа (объектив Х10) высока вероятность контаминации образца содержимым полости рта (слюной). Дальнейшее исследование такого материала нецелесообразно, материал необходимо взять повторно.

            Трахеобронхиальные смывы

• Исследуют при отсутствии мокроты или невозможности её выделить естественным путём. 
• Специальным шприцем  в трахею вводят около 10 мл стерильного физ. раствора и собирают откашливаемый смыв в стерильную посуду.
• Бронхиальные смывы, в том числе вблизи очага воспаления, могут быть сделаны с помощью бронхоскопа.
• Недостатком является очень часто значительное разведение трахеобронхиального содержимого, что снижает возможность выделения бактерий, а концентрация их падает примерно в 100 раз по сравнению с мокротой.

            Плевральная жидкость.

• Кожу перед пункцией обрабатывают 70% этиловым спиртом, затем спиртовой настойкой йода, затем опять спиртом.
•  После прокола жидкость собирают шприцем в сте­рильную пробирку и незамедлительно отправляют в лабораторию.
• Допускается посев плевральной жидкости (по 5 мл) в аэробные и анаэробные флаконы, ис­пользуемые для исследования крови.

• Исследуют утреннюю среднюю порцию (10-20мл) сво­бодно выпущенной мочи (за ночь концентрация бактерий в мочевом пузыре возрастает).
•  Не следует принуждать пациента к приему жидкости для фор­сирования диуреза, так как происходит разбавле­ние мочи и снижение числа бактерий.
• Для сбора мочи используют стерильные ём­кости которые закрываются резиновой стерильной пробкой. Нельзя собирать мочу из мочеприемника или судна.
• Перед взятием мочи проводят тщательный туалет наружных половых органов с мылом и кипяченой водой во избежание излишней ее контамина­ции при мочеиспускании нормальной микрофло­рой промежности.
• Доставка мочи в лабораторию должна осу­ществляться в максимально короткие сроки. Посев следует проводить не позднее 2 ч после взя­тия материала либо в течение 8 ч при условии ее хранения в холодильнике. (При 4°С число бакте­рий в моче обычно остается стабильным в преде­лах 24 ч).
• Взятие мочи следует повторить, если нет ус­ловий для ее хранения в  холодильнике, и с момента взятия образца прошло более 2 часов, в противном случае результаты анализа могут быть недостовер­ными.
• Недопустимо бактериологическое исследова­ние мочи, собранной в течение суток.
• Не рекомендуется исследовать мочу, полу­ченную при наличии постоянного катетера

Внимание:  взятие материала для микробиологического исследования проводит акушер-гинеколог до  проведения мануального исследования

               Амниотическаю жидкость

Собирают через катетер, либо аспирируют при кесаревом сечении, либо пунктируют плодный пузырь.

                Материал из уретры

• Собирают не ранее, чем через 1 ч по­сле мочеиспускания.
• Отделяемое из уретры собирают стерильным ватным тампоном.
•  Если отделяемое получить не удается, наруж­ное отверстие уретры обмывают мылом и ополаски­вают кипяченой водой, вводят в уретру тонкий сте­рильный «уретральный» тампон на глубину 2-4 см, аккуратно вращают его в течение 2 сек., вынимают, по­мещают в соответствующую транспортную среду и доставляют в лабораторию.

              Материал  из вульвы,  преддверия  влагалища

• Берут стерильным ватным тампо­ном..
• При воспалении бартолиниевых желез произ­водят их пункцию.

             Материал из влагалища.

После введения зеркала и подъемника во вла­галище материал собирают стерильным ватным тампоном с заднего свода или с патологически из­мененных участков.

               Цервикальный канал.

• Обнажают шейку матки с помощью зеркал и влагалищную ее часть тщательно обрабатывают ватным тампоном, смоченным стерильным физрас­твором или стерильной водой.
• Тонкий стерильный ватный тампон осторожно вводят в цервикальный канал, не касаясь стенок вла­галища, и берут материал.
• Для бактериологческого исследования можно использовать соскоб слизистой, полученный при диагностическом выскабливании стенок цервикального канала.
  

                Матка.

• Правильное взятие материала из матки может быть выполнено только при  использовании специальных инструментов типа шприца-аспиратора., имеющего на зонде покрытие.
• После прохождения зондом цервикального канала в полость матки раскрывают наружную оболочку зонда и набирают в шприц содержимое матки.
• Материал из шприца помещают в стерильную пробирку.

            Придатки матки.

 Материал из очага инфекции (гной, экссудат, кусочки ткани) получают при оперативном вмеша­тельстве или при диагностической пункции опухо­левидных образований, проводимой через влага­лищные своды.

                Приготовление мазков для микроскопии.

• Помимо взятия материала на посев врач-гинеко­лог готовит мазки для микроскопии (не менее двух - для окраски по Граму и специальными метода­ми), используя отдельные стерильные тампоны или стерильные гинекологические инструменты.
• Предметные стекла, предназначенные для приготовления мазков, маркируют.
• Материал равномерно распределяют на пред­метном стекле осторожными движениями, избегая грубого втирания и резких штриховых движений инструментом.
• Мазок высушивают при комнатной температу­ре, покрывают чистым предметным стеклом или по­мещают его в чашку Петри и отправляют в лаборато­рию.
• Не допускается хранение влажного мазка между двумя стеклами.

                Уретра.

• Материал собирают не ранее 2 часов после мочеиспускания.
• Вводят в уретру тонкий стерильный ватный тампон на глубину 2- 4 см, аккуратно вращают его в течение 1-2 сек., вынимают, помещают в транспорт­ную среду и доставляют в лабораторию.
  

             Исследование секрета простаты.

• Перед отбором проб необходимо тщательно вымыть наружные половые органы и область заднего прохода тёплой водой с мылом, затем сполоснуть тёплой водой.
• Проводят массаж простаты через прямую кишку.  Материал собирают в стерильную пробирку или стерильным ватным тампоном.
• При наличии симптомов острого простатита массаж простаты не проводят.
• Для получения более достоверных результа­тов можно дополнить это исследование бактерио­логическим исследованием мочи, полученной пе­ред и сразу после массажа простаты, что позволит выявить источник инфекции. Основным методом лабораторной диагностики простатита, позволяю­щим определить локализацию очага инфекции, яв­ляется метод Meares и Stamey: исследованию под­вергают первую порцию мочи, среднюю порцию мочи, секрет простаты и порцию мочи, полученные после массажа предстательной железы (так назы­ваемая 4-стаканная проба).
• Пробы клинического материала доставить в лабораторию не замочив пробки, чтобы не исказить результат исследования.
  

            Придатки яичек.

             Материал собирают путем аспирации с помо­щью шприца и иглы.

           Язва полового члена.

•  Очищают поверхность язвы тампоном, смо­ченным физ.раствором.
• Производят соскоб язвы до появления сероз­ной жидкости.
• Стерильной салфеткой удаляют жидкость и органические наслоения (следует из­бегать кровоточивости).
• Надавливают у основания язвы до появления прозрачной жидкости, аспирируют ее шприцем с тонкой иглой, закрывают иглу защитным колпач­ком и транспортируют в лабораторию.
  

• Соскобы слизистых оболочек мочеиспускательного канала и шейки матки берут одноразовыми стерильными зондами, «щёточками», ложкой Фолькмана или аналогичными инструментами со слегка затуплёнными краями, соблюдая правила асептики и антисептики.
• Наружные половые органы дезинфицируют, выделения удаляют тампонами или с помощью аспираторов.
• При повышенной чувствительности слизистую оболочку предварительно анестезируют  инстилляцией в мочеиспукательный канал 1-2 мл  о.5% раствора дикаина.
• Соскобы делают из глубины канала(до 6 см), со всех четырёх квадрантов.
• Соскобы шейки матки берут после удаления слизистой пробки из глубины её канала, а также из влагалищной части шейки матки.
• Соскобы берут осторожно, при лёгком надавливании. В материале должно быть возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи, экссудата и примесей крови.
• Соскобный материал распределяют тонким слоем на поверхность 8-миллиметровой лунки чистого обезжиренного предметного стекла так, чтобы все стороны тампона соприкасались с поверхностью стекла.
• Мазок высушивают на воздухе 20-30 минут.
• Допускается хранение мазка на стекле до фиксации 2-3 часа при комнатной температуре.
• Мазки фиксируют соответственно методу окраски.

Общие показания к обследованию: сепсис неясной этиологии, гангрена, абсцессы, флегмона, перитонит, экссудативный плеврит, нагноения ран с подозрением на анаэробную инфекцию, гнойный артрит. 

Образцы клинического материала для исследования на анаэробы во избежания контакта с атмосферным воздухом получают при использовании инвазивных методов забора.

Исследуемые материалы:  кровь, плевральная, перитонеальная и сино­виальная жидкости,  гной из абсцессов и других закрытых полостей (если объем гноя превышает 2 мл, то в пробирке под резиновой пробкой сохраняются относительно ана­эробные условия в течение нескольких часов), материалы из глубоких отделов свища (после очистки и асептической обработки наружного от­верстия) и ран.

Если нет возможности использо­вать метод аспирации шприцем, материал берут стерильным ватным тампоном, который помещают в анаэробную транспортную среду сохранения и до транспортировки в лабораторию содержат при ком­натной температуре;

Фрагменты костной и мышечной тканей размером 1x1 см, взятые из глубокого очага воспаления во время операции (если сроки доставки мате­риалов в лабораторию превышают 15-20 мин, фрагменты тканей погружают в небольшой объем стерильного физраствора).

            Не подлежат исследованию на анаэробы:  отделяемое поверхностных ран и язв,  мазки из зева, носа и ротовой полости,мазки из влагалища и цервикального канала, мокрота и бронхиальные смывы, моча (кроме мочи, полученной надлобковой пункцией мочевого пузыря),  содержимое желудка, тонкого и толстого ки­шечника, фекалии (за исключением предполагаемой Clostridium difficile-ассоциированной диареи).

• При исследовании на дисбактериоз пациент за 1-3 дня до взятия пробы должен находиться на диете, исключающей приём продуктов, усиливающих процессы брожения в кишечнике, а также алкоголь, антимикробные лекарственные препараты и т. п.
• Фекалии  собирают     сразу    после  дефекации  из предварительно обработанного дез. раствором и тщательно промытого водой  судна, горшка, специального   лотка  или  с пеленки с помощью  стерильной   стеклянной  палочки, проволочной  петли или  деревянного шпателя.
• Порцию фекалий  помещают в стерильный флакон.
• Объём испражнений для исследования на патогенные энтеробактерии,  флору и на дисбактериоз  должен составлять 1/3 флакона, объёмом 20 мл.
• При  наличии   в  испражнениях  патологических  примесей (слизь, хлопья, гной) их  следует  включать  в исследуемую  пробу.
• Материал доставляется в лабораторию в кратчайшие сроки
• Испражнения  для исследования на патогенные энтеробактерии  можно   получить  непосредственно  из  прямой  кишки  с помощью  ректальных,  ватных  или  ватно - марлевых  тампонов, укрепленных  на  металлической  или  деревянной  палочке, вводя   их  круговыми   движениями  в  прямую  кишку  на  6-8 см. 

• Желчь собирают при зондировании в проце­дурном кабинете отдельно по порциям: А, В и С (соответственно  дуоденальное содержимое, пузырную  желчь и  желчь из желчных  протоков) в три стерильные пробирки, либо во время оператив­ного вмешательства с помощью шприца в одну про­бирку.
• Дуоденальное  содержимое  и желчь  имеют  зеленовато - желтый цвет  и щелочную   реакцию. Кислая   реакция, белесоватый  оттенок  жидкости, наличие   хлопьев, свидетельствует  о  примеси  желудочного  сока, такой  материал  не  пригоден  для  исследования.
•  Полученные порции желчи доставляют в ла­бораторию не позднее 1 -2 ч от момента получения, следя за тем, чтобы пробирки находились в строго вертикальном положении
  

Микрбиологическое  исследование грудного молока.

• Отбор проб грудного молока производится в поликлинике или стационаре в специально выделенном помещении.
• Перед сцеживанием молока женщина должна вымыть руки с мылом,  тщательно обрабатывает соски и околососковую область молочных желез отдельными ватными тампонами, смоченными 70⁰ спиртом (каждая железа обрабатывается отдельным тампоном).
• Молоко из правой и левой молочных желез собирается в отдельную посуду.
• Первые 5-10 мл сцеженного молока  исследованию не подлежат.
• Последующие 3-5 мл сцеживаются в стерильные флаконы, которые закрываются стерильными пробками и доставляются  в лабораторию не позднее 2-х часов в вертикальном положении во избежании опрокидывания и замачивания пробок.
•  До момента исследования молоко должно храниться в холодильнике.
• Сцеженное накануне молоко исследованию не подлежит.     

• Для вирусологического исследования отбирают при первом появлении клинических  симптомов, т.е. в остром периоде заболевания (не позднее третьего дня), так как в этот период в носоглотке больного, а также в крови находится максимальное количество вируса.
• Пробы немедленно доставляют в вирусологическое отделение МЛ ГЦГЭ (ул. Короля,23, тел. 200-92-51).
• Материалом для исследования служат соскоб из носа и мазок из зева, а также сыворотки крови, взятые в начале  болезни и в период выздоровления. 

                  Необходимо предварительно  очистить полость носа от слизи ( взрослым – высморкаться, детям – очистить с помощью ватных турунд). Тампон вводят на глубину 2-3- см до нижней раковины, затем слегка опускают книзу , вводят в нижний носовой ход под нижнюю раковину, делают вращательное движение на пол оборота, таким образом, чтобы в мазке было как можно больше эпителиальных клеток. Удаляют тампон вдоль наружной стенки носовой полости, опускают в пробирку с физиологическим раствором. Палочку обломать, флакон закрыть резиновой пробкой.         

                 Для ранней диагностики краснухи выявляют антиген  в клетках цилиндрического эпителия носа от больных или контактных. В качестве материала  для исследования служит соскоб из нижнего носового хода (см.п.1- соскоб из носа). 

• Парные сыворотки исследуют для определения прироста титра антител к вирусам (во второй сыворотке по сравнению с первой).
• Первую кровь берут в самом начале заболевания, вторую – 10-14 дней спустя.
• Кровь в объеме не менее 1 мл берут в чистую центрифужную пробирку, отделяют сыворотку и помешают в пластиковую пробирку, которую хранят в морозильной камере до взятия второй сыворотки от того же больного.
• В вирусологическое отделение МЛ обе сыворотки  доставляются одновременно.
• Результаты исследования зависят от качества доставляемого материала, от сроков забора и своевременной доставки в лабораторию.    

              Для обследования контактных с рота -, энтеро-, полиовирусной инфекцииями забирают пробы фекалий массой 1-2 г.  в чистый флакон.